Susieto fermento imunoabsorbcijos tyrimo metodas – angliškai Enzyme-Linked Immuno Assay – arba ELISA testas yra imunologinis testas, leidžiantis aptikti arba ištirti molekules biologiniame mėginyje. Ją 1971 m. sukūrė ir sukūrė du Švedijos mokslininkai Peteris Perlmannas ir Eva Engvall Stokholmo universitete.

Molekulės, tiriamos ELISA metodu, paprastai yra baltymai. O mėginių tipai apima skystas biologines medžiagas – plazmą, serumą, šlapimą, prakaitą, ląstelių auginimo terpę arba rekombinantinį baltymą – baltymą, kurį gamina ląstelė, kurios genetinė medžiaga buvo pakeista genetinės rekombinacijos būdu – išgryninta į tirpalą.

ELISA testas daugiausia naudojamas imunologijoje, siekiant aptikti ir (arba) išmatuoti baltymų, antikūnų ar antigenų buvimą mėginyje. Šiuo serologiniu tyrimu visų pirma aptinkami antikūnai, kuriuos organizmas gamina reaguodamas į virusinį užteršimą.

Antikūnų naudojimas infekcinėms ligoms diagnozuoti yra specifinis ir greitas metodas. ELISA metodas yra imunofermentinis metodas, leidžiantis iš biologinio mėginio vizualizuoti reakcijas tarp antigeno – organizmo, kurį gyvas organizmas laiko svetimu – ir antikūno, naudojant spalvinę reakciją, kurią sukuria fermento žymeklis. paprastai šarminė fosfatazė ir peroksidazė – anksčiau prisijungusios prie antikūno. Spalvos reakcija patvirtina išskirtos bakterijos identifikavimą arba norimo viruso buvimą, o spalvos intensyvumas parodo antigenų arba antikūnų kiekį duotame mėginyje.

Yra keturi pagrindiniai ELISA testo tipai:

• ELISA tiesioginis, leidžia aptikti arba išmatuoti antikūnus. Jis naudoja tik pirminį antikūną;
• ELISA netiesioginis, plačiausiai naudojamas, taip pat leidžia aptikti arba ištirti antikūnus. Jis naudoja antrinį antikūną, kuris suteikia jam didesnį jautrumą nei tiesioginė ELISA;
• ELISA varžybose, leidžia dozuoti antigenus. Pagaminta konkuruojant dėl ​​ryšių, jame nenaudojamas fermentas;
• ELISA „sumuštinyje“, leidžia dozuoti antigenus. Ši technika dažniausiai naudojama tyrimams.

ELISA testas naudojamas:

• Surasti ir išmatuoti antikūnus serologijoje infekcinių ligų diagnostikai: virusologija, parazitologija, bakteriologija ir kt.;
• Mažos koncentracijos baltymų dozės: specifinės tam tikrų plazmos baltymų (imunoglobulino E (IgE), feritino, baltymų hormonų ir kt.), naviko žymenų ir kt. dozės;
• Dozuokite mažas molekules: steroidinius hormonus, skydliaukės hormonus, vaistus ...

ELISA testas ypač naudojamas diagnozuoti daugelį infekcinių ligų:

Lytiškai plintančios ligos (LPL)

Įskaitant hepatitą, sifilį, chlamidiją ir ŽIV. Sveikatos priežiūros institucijų rekomenduojamas tai pagrindinis AIDS patikros testas: jis parodo antikūnų prieš ŽIV ir p24 antigeno buvimą praėjus šešioms savaitėms po užsikrėtimo.

Regioninės arba endeminės ligos

Geltonoji karštligė, Marburgo virusinė liga (MVM), Ladengue, Laimo liga, Chikungunya, Rifto slėnio karštligė, Ebola, Lasos karštligė ir kt.

Covid-19

ELISA testas, atliekamas praėjus daugiau nei 2–3 savaitėms nuo simptomų atsiradimo, leidžia greičiau nei per valandą nustatyti antikūnų prieš SARS-CoV-2 buvimą.

Virusiniai patogenai, sukeliantys prenatalines infekcijas

Pavyzdžiui, toksoplazmozė, raudonukė, citomegalovirusas, herpes simplex.

Kiti atvejai

Tačiau jis taip pat rado programų aptikimui:

• Nėštumas;
• Autoimuninės ligos;
• Maisto alergenai: kiekybinis bendro imunoglobulinų E (IgE) nustatymas padeda įvertinti ir gydyti alergijas;
• Hormoniniai sutrikimai;
• naviko žymenys;
• Augalų virusai;
• Ir daug daugiau

Kaip antikūnų prieš SARS-CoV-2 aptikimo dalis, bandomasis tyrimas, kurį 2020 m. rugpjūčio mėn. atliko Institut Pasteur, CNRS, Inserm ir Paryžiaus universitetas, patvirtina ELISA testo patikimumą: abu ELISA testai buvo išbandyti. visas SARS-CoV-2 N baltymas (ELISA N) arba viruso smaigalio ekstraląstelinis domenas (S) kaip tiksliniai antigenai. Šis metodas leistų nustatyti antikūnus daugiau nei 90 % atvejų, o klaidingai teigiamų rezultatų dažnis yra labai mažas – 1 %.

Analizės laboratorijose pagal gydytojo receptą atliekami Elisa tyrimai kainuoja apie 10 eurų ir juos 100% kompensuoja sveikatos draudimas.

Atliekami nemokamuose informacijos, patikros ir diagnostikos centruose (CeGIDD), jie gali būti nemokami dėl ŽIV ir SARS-CoV-2.